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抗體檢測試劑盒的使用前準備工作別忘了！News
抗體檢測試劑盒的使用前準備工作別忘了！
更新時間：2019-12-04 點擊次數(shù)：1674次
抗體檢測試劑盒的使用前準備工作別忘了！
在常見的實驗中，抗體檢測試劑盒測定過程為試劑準備工作，加樣，洗滌，保溫等正常的實驗流程，一次好的準備工作可以使測定中試劑發(fā)揮大的作用，也可以因為一個小步驟而發(fā)生多種測定結果。那么在實際檢測前，用戶都需要做哪些準備工作呢？
1、加樣
在抗體檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在抗體檢測試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。 加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。
2、試劑盒準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑?？贵w檢測試劑盒中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
3、保溫
在抗體檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在抗體檢測試劑盒中似不恰當?？贵w檢測試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。
4、洗滌
洗滌在抗體檢測試劑盒過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。抗體檢測試劑盒就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來?？梢哉f在抗體檢測試劑盒操作中，洗滌是主要的關鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。洗滌的方式除某些抗體檢測試劑盒儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
